Test: ELISA och snabbtester för diagnostik av virus- och bakterieinfektioner

Testet är gjort av: Niklas Dahrén, medicinlektioner.se

Antalet frågor:

Varför är kunskap om antigener och antikroppar grundläggande för att förstå ELISA?

I ELISA-testet tillsätts både syntetiska antigener och antikroppar till patientens serumprov för att påvisa infektion

ELISA bygger på specifik bindning mellan antigen och antikropp

De fungerar som enzymer i reaktionen vilket spjälkar ett substrat och ger ett färgat komplex

ELISA bygger på att patientens antigen bryter ned antikroppar i provet vilket ger en färgreaktion

De används för att färga proverna och visualisera resultatet

Vilka två huvudvarianter av ELISA används främst inom diagnostik?

Antikropps-ELISA (indirekt) och antigen-ELISA (sandwich)

Snabbtest-ELISA och cell-ELISA

Direkt ELISA och PCR

Kvalitativ och kvantitativ ELISA

Antikropps-ELISA (sandwich) och antigen-ELISA (indirekt)

Kompetitiv ELISA och Western blot

Vilket påstående om antigener och antikroppar är korrekt?

Antikroppar är enzymer

Antikroppar känns igen specifikt av antigener

Antikroppar är alltid virus

Antigener produceras av B-celler

Antigener känns igen specifikt av antikroppar

Antigener binder ospecifikt till antikroppar

Vad innebär det om brunnarna blir färgade i ett antigen-ELISA (sanswish ELISA)?

Att ospecifik bindning har skett

Att antigen saknas i brunnarna

Att enzymet har brutits ned

Att patientprovet innehåller antikroppar som bundit till antigenet

Att tvättstegen har varit för många

Att patientprovet innehåller antigen som har bundits mellan två tillsatta antikroppar

Vad betyder förkortningen ELISA?

Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

Enzymatic Ligand Interaction Sample Analysis

Enzyme-Linked ImmunoSpecific Analysis

Enzyme-Labeled Immune Serum Assay

Enzymatic Lipid Immuno Signal Assay

Vilket är det första steget i ett antikropps-ELISA?

Tvättning av brunnar

Tillsats av substrat

Tillsats av enzymbundet sekundär antikropp

Beläggning av brunnar med känt antigen

Beläggning av brunnarna med en specifik fångstantikropp

Tillsats av patientprov

Vilken variant av ELISA visar bilden?

Antigen-ELISA (Sandwich ELISA)

Antikropps-ELISA (Indirekt ELISA)

Vad visar bokstav E?

Fagocyt

Antigen

Antikropp

En enzymmärkt sekundärantikropp

Receptor

Vilken variant av ELISA visar bilden?

Antigen-ELISA (Sandwich ELISA)

Antikropps-ELISA (Indirekt ELISA)

10.

Vad är felaktigt angående snabbtester?

Antigen-snabbtester påvisar själva antigenet, ofta ett ytprotein på patogenen, och används främst på näs-/svalgprov.

Snabbtester, ofta utformade som lateral flow-tester, används för att snabbt påvisa patogenen själv (antigenet) eller kroppens immunsvar (antikroppar).

En enzymmärkt sekundärantikropp tillsätts till testremsan och binder till eventuella antigener i patientprovet. Tvättning tar bort sekundärantikroppar som inte har bundit specifikt.

Testen är enkla att använda och kräver minimal laboratorieutrustning – ofta räcker testremsa, provuppsamlingsmaterial och ett dropprör eller pipett.

Provet appliceras på testremsan och rör sig med kapillärverkan genom remsan. Färgmärkta bindande ämnen i remsan kan binda antigen eller antikroppar från provet, beroende på testets typ. Om målämnet finns bildas ett komplex som fastnar vid testlinjen och syns som ett färgat band. Överskottet fortsätter vidare till kontrollinjen, som visar att testet fungerat korrekt.

Antikropps-snabbtester (serologiska) påvisar kroppens antikroppar mot ett antigen och används på prov från blod eller serum.

11.

Vad visar bokstav A?

Antigen

Fagocyt

En enzymmärkt sekundärantikropp

Antikropp

Receptor

12.

Vad visar bokstav B?

Receptor

En enzymmärkt sekundärantikropp

Fagocyt

Antigen

Antikropp

13.

Vad innebär det om brunnarna blir färgade i ett antikropps-ELISA (indirekt ELISA)?

Att enzymet har brutits ned

Att patientprovet innehåller antikroppar som bundit till antigenet

Att patientprovet innehåller virus- eller bakterieantigener som bundit till en tillsatt antikroppar

Att patientprovet innehåller antigen som har bundits mellan två tillsatta antikroppar

Att ospecifik bindning har skett

Att antigen saknas i brunnarna

Att tvättstegen har varit för många

14.

Varför kallas antigen-ELISA för ”sandwich ELISA”?

Två antigener binds samtidigt

Brunnarna har två lager med enzymer

Antigenet ligger mellan två enzymer

Antikroppen binds mellan två antigener

Antigenet binds mellan två antikroppar

15.

Vilket är det första steget i ett antigen-ELISA (sandwich-ELISA)?

Tillsats av patientprov med misstänkt antigen

Tvättning av brunnarna

Tillsats av enzymbundet detektionsantikropp

Beläggning av brunnar med känt antigen

Tillsats av substrat

Beläggning av brunnarna med en specifik fångstantikropp

Tillsats av enzymbundet sekundär antikropp

16.

Vilket av följande är ett korrekt användningsområde för ELISA inom medicinsk diagnostik?

Amplifiering av virus- eller bakterie-DNA för att påvisa virus- eller bakterieinfektioner

Odling av bakterier för resistensbestämning

Bestämning av DNA-sekvenser genom antigen-antikroppsbindning

Mätning av blodets pH-värde

Påvisning av antigen eller antikroppar vid infektioner

Direkt visualisering av virus i mikroskop

17.

Vilken är en central skillnad mellan ELISA och snabbtester?

Snabbtester är mer känsliga än ELISA och ger kvantitativa resultat vilket ELISA inte ger

Snabbtester ger exakt koncentration

ELISA är mer känsligt och ofta kvantitativt, snabbtester är snabbare men mindre känsligt och ej kvantitativt

ELISA kan endast påvisa antikroppar medan snabbtester kan endast påvisa antigen

ELISA kräver alltid fluorescerande antikroppar medan snabbtester alltid använder enzymatiska signaler

Snabbtester kräver längre analystid

Snabbtester kräver avancerad laboratorieutrustning medan ELISA kan utföras helt utan instrument

18.

Vilken variant av ELISA visar bilden?

Antigen-ELISA (Sandwich ELISA)

Antikropps-ELISA (Indirekt ELISA)

19.

Vilket är korrekt ordningsföljd för antigen-ELISA (sandwich)?

Patientens prov (innehåller ev. antigen) → Fångstantikropp → Enzymmärkt sekundärantikropp → Substrat

Enzymmärkt sekundärantikropp → Patientens prov (innehåller ev. antigen) → Fångstantikropp → Substrat

Patientens prov (innehåller ev. antigen) → Fångstantikropp → Substrat → Enzymmärkt sekundärantikropp

Fångstantikropp → Patientens prov (innehåller ev. antigen) → Enzymmärkt sekundärantikropp → Substrat

Fångstantikropp → Patientens prov (innehåller ev. antigen) → Substrat → Enzymmärkt sekundärantikropp

20.

Varför tvättas brunnarna efter nästan varje tillsats i ett ELISA-test?

För att katalysera substratreaktionen innan sekundärantikroppen tillsätts

För att säkerställa att antigenet binds permanent till plastytan

För att neutralisera patientprovet och förhindra immunreaktioner

För att öka enzymets aktivitet så att färgen utvecklas snabbare

För att avlägsna obundet material som annars kan ge falskt positiva signaler och bakgrundsfärg

21.

Vilket påstående om snabbtester är korrekt?

De använder PCR-teknik

De kräver avancerad laboratorieutrustning

De är mer känsliga än ELISA

De är ett förenklat ELISA

De ger kvantitativa resultat

Name