Test: ELISA och snabbtester för diagnostik av virus- och bakterieinfektioner

Testet är gjort av: Niklas Dahrén, medicinlektioner.se

Antalet frågor:

Varför kallas antigen-ELISA för ”sandwich ELISA”?

Antikroppen binds mellan två antigener

Antigenet ligger mellan två enzymer

Brunnarna har två lager med enzymer

Två antigener binds samtidigt

Antigenet binds mellan två antikroppar

Vilken variant av ELISA visar bilden?

Antikropps-ELISA (Indirekt ELISA)

Antigen-ELISA (Sandwich ELISA)

Vad innebär det om brunnarna blir färgade i ett antigen-ELISA (sanswish ELISA)?

Att tvättstegen har varit för många

Att antigen saknas i brunnarna

Att enzymet har brutits ned

Att patientprovet innehåller antikroppar som bundit till antigenet

Att ospecifik bindning har skett

Att patientprovet innehåller antigen som har bundits mellan två tillsatta antikroppar

Varför är kunskap om antigener och antikroppar grundläggande för att förstå ELISA?

ELISA bygger på specifik bindning mellan antigen och antikropp

ELISA bygger på att patientens antigen bryter ned antikroppar i provet vilket ger en färgreaktion

De fungerar som enzymer i reaktionen vilket spjälkar ett substrat och ger ett färgat komplex

De används för att färga proverna och visualisera resultatet

I ELISA-testet tillsätts både syntetiska antigener och antikroppar till patientens serumprov för att påvisa infektion

Vad är felaktigt angående snabbtester?

Antigen-snabbtester påvisar själva antigenet, ofta ett ytprotein på patogenen, och används främst på näs-/svalgprov.

Antikropps-snabbtester (serologiska) påvisar kroppens antikroppar mot ett antigen och används på prov från blod eller serum.

Provet appliceras på testremsan och rör sig med kapillärverkan genom remsan. Färgmärkta bindande ämnen i remsan kan binda antigen eller antikroppar från provet, beroende på testets typ. Om målämnet finns bildas ett komplex som fastnar vid testlinjen och syns som ett färgat band. Överskottet fortsätter vidare till kontrollinjen, som visar att testet fungerat korrekt.

En enzymmärkt sekundärantikropp tillsätts till testremsan och binder till eventuella antigener i patientprovet. Tvättning tar bort sekundärantikroppar som inte har bundit specifikt.

Snabbtester, ofta utformade som lateral flow-tester, används för att snabbt påvisa patogenen själv (antigenet) eller kroppens immunsvar (antikroppar).

Testen är enkla att använda och kräver minimal laboratorieutrustning – ofta räcker testremsa, provuppsamlingsmaterial och ett dropprör eller pipett.

Vilken är en central skillnad mellan ELISA och snabbtester?

Snabbtester kräver avancerad laboratorieutrustning medan ELISA kan utföras helt utan instrument

Snabbtester kräver längre analystid

ELISA är mer känsligt och ofta kvantitativt, snabbtester är snabbare men mindre känsligt och ej kvantitativt

ELISA kan endast påvisa antikroppar medan snabbtester kan endast påvisa antigen

Snabbtester är mer känsliga än ELISA och ger kvantitativa resultat vilket ELISA inte ger

Snabbtester ger exakt koncentration

ELISA kräver alltid fluorescerande antikroppar medan snabbtester alltid använder enzymatiska signaler

Vilket påstående om snabbtester är korrekt?

De är ett förenklat ELISA

De ger kvantitativa resultat

De är mer känsliga än ELISA

De använder PCR-teknik

De kräver avancerad laboratorieutrustning

Vilket påstående om antigener och antikroppar är korrekt?

Antigener känns igen specifikt av antikroppar

Antigener produceras av B-celler

Antigener binder ospecifikt till antikroppar

Antikroppar är enzymer

Antikroppar känns igen specifikt av antigener

Antikroppar är alltid virus

Vilken variant av ELISA visar bilden?

Antikropps-ELISA (Indirekt ELISA)

Antigen-ELISA (Sandwich ELISA)

10.

Vilket är det första steget i ett antikropps-ELISA?

Tillsats av substrat

Tvättning av brunnar

Beläggning av brunnarna med en specifik fångstantikropp

Beläggning av brunnar med känt antigen

Tillsats av patientprov

Tillsats av enzymbundet sekundär antikropp

11.

Vad visar bokstav E?

Antigen

Antikropp

En enzymmärkt sekundärantikropp

Fagocyt

Receptor

12.

Vad visar bokstav A?

Antikropp

Fagocyt

Receptor

En enzymmärkt sekundärantikropp

Antigen

13.

Vilket av följande är ett korrekt användningsområde för ELISA inom medicinsk diagnostik?

Påvisning av antigen eller antikroppar vid infektioner

Mätning av blodets pH-värde

Odling av bakterier för resistensbestämning

Direkt visualisering av virus i mikroskop

Amplifiering av virus- eller bakterie-DNA för att påvisa virus- eller bakterieinfektioner

Bestämning av DNA-sekvenser genom antigen-antikroppsbindning

14.

Vad betyder förkortningen ELISA?

Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

Enzyme-Labeled Immune Serum Assay

Enzymatic Ligand Interaction Sample Analysis

Enzymatic Lipid Immuno Signal Assay

Enzyme-Linked ImmunoSpecific Analysis

15.

Vilken variant av ELISA visar bilden?

Antigen-ELISA (Sandwich ELISA)

Antikropps-ELISA (Indirekt ELISA)

16.

Vilket är det första steget i ett antigen-ELISA (sandwich-ELISA)?

Tillsats av patientprov med misstänkt antigen

Tillsats av enzymbundet sekundär antikropp

Beläggning av brunnarna med en specifik fångstantikropp

Tillsats av enzymbundet detektionsantikropp

Tvättning av brunnarna

Beläggning av brunnar med känt antigen

Tillsats av substrat

17.

Vilka två huvudvarianter av ELISA används främst inom diagnostik?

Antikropps-ELISA (sandwich) och antigen-ELISA (indirekt)

Direkt ELISA och PCR

Kvalitativ och kvantitativ ELISA

Snabbtest-ELISA och cell-ELISA

Kompetitiv ELISA och Western blot

Antikropps-ELISA (indirekt) och antigen-ELISA (sandwich)

18.

Vad innebär det om brunnarna blir färgade i ett antikropps-ELISA (indirekt ELISA)?

Att ospecifik bindning har skett

Att patientprovet innehåller virus- eller bakterieantigener som bundit till en tillsatt antikroppar

Att tvättstegen har varit för många

Att enzymet har brutits ned

Att patientprovet innehåller antikroppar som bundit till antigenet

Att antigen saknas i brunnarna

Att patientprovet innehåller antigen som har bundits mellan två tillsatta antikroppar

19.

Vilket är korrekt ordningsföljd för antigen-ELISA (sandwich)?

Fångstantikropp → Patientens prov (innehåller ev. antigen) → Substrat → Enzymmärkt sekundärantikropp

Fångstantikropp → Patientens prov (innehåller ev. antigen) → Enzymmärkt sekundärantikropp → Substrat

Enzymmärkt sekundärantikropp → Patientens prov (innehåller ev. antigen) → Fångstantikropp → Substrat

Patientens prov (innehåller ev. antigen) → Fångstantikropp → Substrat → Enzymmärkt sekundärantikropp

Patientens prov (innehåller ev. antigen) → Fångstantikropp → Enzymmärkt sekundärantikropp → Substrat

20.

Vad visar bokstav B?

Receptor

Antigen

Fagocyt

En enzymmärkt sekundärantikropp

Antikropp

21.

Varför tvättas brunnarna efter nästan varje tillsats i ett ELISA-test?

För att katalysera substratreaktionen innan sekundärantikroppen tillsätts

För att öka enzymets aktivitet så att färgen utvecklas snabbare

För att avlägsna obundet material som annars kan ge falskt positiva signaler och bakgrundsfärg

För att säkerställa att antigenet binds permanent till plastytan

För att neutralisera patientprovet och förhindra immunreaktioner

Name